Implementación de protocolos de aislamiento y cultivo de células madre mesenquimales de la gelatina de wharton del cordón umbilical como base para estudios de regeneración de tejidos

Abstract

La investigación en células madre ha adquirido un auge vertiginoso debido a su potencial aplicación en reparación y regeneración de tejidos humanos y, por lo tanto, en terapia a nivel celular. En los últimos años, la investigación en células madre mesenquimales (MSCs) tiene especial atención debido a su larga capacidad de proliferación, potencial de diferenciación múltiple y propiedades inmuno-moduladoras. Una de las fuentes más prácticas de obtención de dichas células es la gelatina de Wharton del cordón umbilical. Las MSCs humanas derivadas de la gelatina de Wharton (hWJ-MSCs) son más primitivas que las obtenidas de la médula ósea de adultos y no sufre del escrutinio ético en su investigación puesto que son obtenidas de un tejido que es descartado después del alumbramiento. Debido a la reconocida importancia terapéutica que tiene las células madre y a la limitada investigación formal en esta área en el Ecuador, el presente proyecto de tesis realizó los primeros estudios de aislamiento y proliferación de hWJ-MSCs obtenidas del cordón umbilical, en colaboración con el Hospital Luis Vernaza de la Junta de Beneficencia de Guayaquil. La obtención de las MSCs se realizó mediante el tratamiento de la gelatina de Wharton, diseccionada de un cordón umbilical humano, con colagenasa tipo I durante 3, 14 y 16 horas. Se tuvo éxito con 3 horas de digestión, sin ninguna diferencia significativa en las variables analizadas. La células obtenidas se dejaron proliferar por algunos días a 37oC y en una atmósfera con 5% CO2. Para determinar su capacidad de diferenciación, algunas células se sometieron a un tratamiento de inducción osteogénica. El éxito de dicha diferenciación fue comprobado por la elevada actividad de la fosfatasa alcalina y la deposición de calcio. Adicionalmente se probó la capacidad proliferativa de las MSCs en un material derivado del mesocarpio de la mazorca de cacao para determinar su citocompatibilidad como andamio natural. El presente estudio estableció la factibilidad de realizar esta línea de investigación y se espera captar mayor interés por parte de los investigadores ecuatorianos en torno al tema de las hWJ-MSCs y su aplicación en la regeneración de tejidos.