Producción de anticuerpos monoclonales y desarrollo de inmunoensayos para la identificación de una cepa de Vibrio alginolyticus utilizada como probiótico.

Donoso Gómez, Edward

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Facultad de Ingeniería Marítima y Ciencias del Mar
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Tesis de Acuicultura
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dc.contributor.advisor	Calderón, Jorge, Director
dc.contributor.author	Donoso Gómez, Edward
dc.creator	ESPOL. FIMCM
dc.date.accessioned	2024-01-15T14:02:43Z
dc.date.available	2024-01-15T14:02:43Z
dc.date.issued	1996
dc.identifier.citation	Donoso Gómez, E. (1996). Producción de anticuerpos monoclonales y desarrollo de inmunoensayos para la identificación de una cepa de Vibrio alginolyticus utilizada como probiótico.. [Tesis.]. ESPOL. FIMCM .
dc.identifier.uri	http://www.dspace.espol.edu.ec/handle/123456789/59595
dc.description	Las enfermedades bacterianas son particularmente importantes en los Iaboratorios tal es el caso del Síndrome de "bolitas" que luego de una fuse epidémica se transformó en una endemia a una escala relatÍvamente grande. Esta enfermedad, ocasionada por Vibrio harveyi, se mostró difícil de contrr¡lar con la ayuda de antibióticos, Io que ha ocasionado la aparición de resistencia ) contaminación del medio ambiente. Una alternativa, iniciada por los productores, fue la de utilizar bacteri¿rs de Ie flora normal para prevenir el desarrollo de la enfermedad, siendo este efecto "probiótico" debido a una capacidad de competición con Ias bacterias patógenas. Una cepa probiótica de Vibrio alginolyticus, denominada Ili, fue aislada -v- utilizada como probiótico. La falta de herramientas para detectar y'cuantificar la cepa probiótica, impidió que la utilización de probióticos supere ciertos problemas para su aplicación, por lo que se hacia indispensable Ia incorporación de técnicas y metodologías que nos permitan tener un ma.v*or control en el uso de probióticos. El presente trabajo fue emprendido con el objetivo de preparar rnticuerpos monoclonales específicos de la cepa lli y de desarrollar una inmunoprueba de tipo colony-blot que permita la detección y la cuantificación mu.'" simple, rápida y confiable de esta bacteria entre las poblaciones baclerianas compleias asociadas a las larvas de camarones en condiciones de laboratorio. Se inmunizaron ratones Balb/c con suspensiones bacterianas previamente sometidas a ciclos de congelación y descongelación. Según la técnica de hibridación linfocitaria, se obtuvieron .147 hibridomas preclonados. de los cuales 118 fueron primeramente seleccionados por dot-blot en base a su reactividad contra Ili. Una segunda operación de selección por dot-blot, utilizando otras cepas bacterianAs (V. alginoltticus, cepa L58; V. harveyi, cepa E22: Escherichia coli), permitió seleccionar l3 hibridomas estrictamente especÍficos de la cepa "lli" y' 3 específicos de V. alginoltticus. Luego del clonaje, se seleccionaron 3 hibridomas (286, 2G1 ¡r l2G6) en base a su calidad de crecimiento y a la intensidad de respuesta contra ni determinada en ELISA. EI anticuerpo monoclonal 286 fue subsecuenlemente utilizado para desarrollar )'optimizar una prueba de tipo colony-blot. Esra inmunoprueba se mostró perfectamente especifica y permitió detectar y cuantificar colonias de tli en caias de Petri desde Ia quinta hora de cultivo, mientras que las colonias son todavia invisibles al ojo humano. Esta inmunoprueba colon."--blot fue evaluada para el uso de [a bacteria probiótica ¡li en situaciones experimentales y está en curso de evaluación en laboratorios comerciales,
dc.format	application/pdf
dc.format.extent	106 Páginas
dc.language.iso	spa
dc.publisher	ESPOL. FIMCM
dc.rights	openAccess
dc.subject	Anticuerpos monoclonales
dc.subject	Larvas de camarón
dc.title	Producción de anticuerpos monoclonales y desarrollo de inmunoensayos para la identificación de una cepa de Vibrio alginolyticus utilizada como probiótico.
dc.type	Acuicultor,
dc.identifier.codigoespol	T-16683
dc.description.city	Guayaquil
dc.description.degree	Escuela Superior Politécnica del Litoral,
dc.identifier.codigoproyectointegrador	ESC879
dc.description.abstractenglish	XXX