En la producción agrícola, el constante uso de fungicidas convencionales para el control de hongos patógenos genera problemas de resistencia adquirida que, a su vez, ocasiona serios daños ambientales y un incremento anual de los costos de producción. Una de las principales amenazas para el cultivo del banano es la fusariosis, provocada por el hongo Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Foc). Se requiere de nuevas alternativas eficientes para el control de enfermedades. Una de ellas es la aplicación de la tecnología ARN de interferencia (ARNi) en la que una molécula de ARN de doble cadena (ARNdc) se puede utilizar para activar el mecanismo de silenciamiento genético en el individuo deseado. En este estudio se evaluó el mecanismo de ARNi en Foc raza 1 efectuándose ensayos a nivel in vitro e invernadero. Se consideraron tres genes objetivos para sintetizarlos en ARNdc, basándose en la secuencia de los genes de FocR1: Beta tubulina (Foc?-tub), C5 ? Esterol desaturasa (FocERG3), Quitina sintasa 1 (FocChs1), adicionalmente el gen adenilato ciclasa (FocAdcy) fue utilizado como un control positivo en la evaluación de la inhibición a través de ensayos de germinación de esporas en placas Petri. Se calculó el IC50 de cada gen objetivo considerando 4 dosis del ARNdc. Adicionalmente se determinó la translocación de la molécula de ARNdc en plántulas de banano aplicadas en la hoja número 3, evaluándose a 1, 12, 24 y 48 horas post aplicación (hpa) mediante la técnica de Northern blot. Finalmente, para formulaciones futuras, se determinó un ratio de intercalación entre el ARNdc y nanopartículas de hidróxido dobles en capas (LDH por sus siglas en inglés) como acarreadores para posibles aplicaciones en campo. Los resultados demostraron que el ARNdcFocChs1 fue más efectivo para la inhibición de esporas con un IC50 promedio de 156.84 mg/L superando a ARNdcFoc?-tub (IC50: 532.7 mg/L), ARNdcFocERG3 (IC50: 635.59 mg/L) e incluso al control ARNdcFocAdcy (IC50: 243.91 mg/L). En relación con la translocación de la molécula, se observó que hasta las 48 hpa, el ARNdc permanecía sin degradación; sin embargo, no se detectó translocación a otros tejidos de la plántula de banano hasta el último punto de evaluación. Finalmente, se demostró que el ARNdcFoc?-tub sintetizado de forma invitro puede ser intercalado con sustancias no toxicas y de fácil degradación como las nanopartículas LDH a una relación del ratio de sus masas de 1:15, lo cual permitiría transportar y proteger el ARNdc en condiciones de campo