Abstract:
Con la aparición del COVID-19se evidenció una escasez de reactivos y pruebas por la demanda de diagnósticos contra esta enfermedad. Por otro lado, con la vacunación surgió la necesidad de un seguimiento de la inmunidad de la población. Por esta razón se busca implementar un diagnóstico tipo ELISA localmente que detecte los anticuerpos contra la espícula de este virus. Propuesta que cumple con el objetivo de Salud y Bienestar de la ONU, y permitirá estar preparado ante la necesidad de dosis de refuerzo y de diagnósticos de futuras variantes. Se escogió una región de la espícula, y se clonó en un vector adecuado para células de mamíferos. Se transfectó en células HEK293. SerealizarondosWestern Blots, probando un Anti-Flag y un suero positivo contra el virus.La construcción del plásmido fue obtenida de manera exitosa, y comprobada por secuenciación. La proteína fue detectada solo por el suero positivo contra el virus, sin embargo, su tamaño fue menor al que se esperaba. Para el diseño del ensayo tipo ELISA se establecieron las variables a tomar en cuenta, y se propuso un ensayo base. La obtención deconstrucción genética y el diseño del ELISA representan un gran avance para la implementación de este inmunodiagnóstico de manera local, el cual encaminará al Ecuador a la soberanía sanitaria que necesita.
