Resumen:
CONDITION FOR PUBLICATION OF PROJECT. Scientific interest in the Cannabis sativa plant, its metabolites and potential therapeutic applications has experienced an unprecedented boom in the last decade. Due to its medicinal properties, cannabidiol (CBD), has become the main cannabinoid of numerous studies, thus boosting research in both clinical and analytical fields; inflorescences, containing the highest metabolic load, are the main useful matrix for the subsequent extraction of the analyte, generation of extracts, derivative products and for the research enrichment that arises around CBD in the laboratory. The focus of this research was the development and validation of an analytical method to determine the CBD content in inflorescences by high performance liquid chromatography with diode array detector (HPLC-DAD), the different validation parameters were evaluated according to the AOAC 2018.10 standard, allowing to obtain results that guarantee the analytical competence in each test with confidence and veracity, which support the quality of the laboratory.
The results obtained for each of the quality parameters allowed satisfying each validation objective, obtaining a selective method with a resolution greater than 1.5; for LOD: 0.29 mg/g, LOQ: 0.87 mg/g; the linearity evaluated per day exceeded an 𝒓𝟐 of 0.995; the %RSDr for both high level and low level was 1.45% and 4.76% respectively; for %RSDi at high level 3.43% was obtained and low level 3.67%; the recovery for low level was 93.56% and high level 99.14%; finally in robustness the method resulted sensitive to variations. According to the results reported for each parameter, the method developed for the laboratory of Medicinal Chemistry of the University of Azuay is validated with its respective recommendations.
Keywords: CBD, HPLC-DAD, cannabinoids, validation, quality.
Descripción:
CONDICIONAMIENTO DE PUBLICACION DE PROYECTO. El interés científico en la planta de Cannabis sativa, sus metabolitos y sus potenciales aplicaciones terapéuticas ha experimentado un auge sin precedentes en la última década. Debido a sus propiedades medicinales, el cannabidiol (CBD), se ha convertido en el cannabinoide principal de numerosos estudios, impulsando así la investigación tanto en el ámbito clínico como en el analítico. Las inflorescencias, al contener la carga metabólica más alta, son la matriz de principal utilidad para la posterior extracción del analito, generación extractos, productos derivados y para el enriquecimiento investigativo que surja en torno al CBD en el laboratorio. El enfoque de esta investigación radicó en el desarrollo y validación de un método analítico para determinar el contenido de CBD en inflorescencias por cromatografía líquida de alta resolución con detector de arreglo de diodos (HPLC-DAD), se evaluó los distintos parámetros de validación según lo que establece la norma AOAC 2018.10, permitiendo obtener resultados que garantizan la competencia analítica en cada ensayo con la confianza y la veracidad, que respaldan la calidad del laboratorio. Los resultados obtenidos en cada uno de los parámetros de calidad han permitido satisfacer cada objetivo de validación llegando a obtener un método selectivo con una resolución mayor a 1,5; en cuanto a LOD: 0,29 mg/g, LOQ: 0,87 mg/g; la linealidad evaluada por día superó un 𝒓𝟐 de 0,995; el %RSDr tanto para nivel alto como para el nivel bajo reportó 1,45% y 4,76% respectivamente; para %RSDi a nivel alto se obtuvo 3,43% y a nivel bajo 3,67%; la recuperación para nivel bajo fue 93,56% y para el nivel alto 99,14%; finalmente en robustez el método resultó sensible a variaciones. Según resultados reportados por cada parámetro, queda validado el método desarrollado para el laboratorio de Química médica de la universidad del Azuay con sus respectivas recomendaciones
