Abstract:
CONDITION FOR PUBLICATION OF PROJECT. Pitaya (Hylocereus spp.) is a tropical fruit that has gained worldwide recognition in recent years. In Ecuador, it’s a product of increasing economic value that has positioned the country as one of the main exporters in South America. However, its production is limited by viral infections that can affect fruit yield and quality, especially those caused by the genera Potexvirus and Badnavirus. This project aims to establish a multiplex endpoint RT-PCR methodology for the simultaneous detection of prevalent viruses in pitaya. For this purpose, primers were designed and validated to detect both viruses, as well as a housekeeping gene (ACT7), which served as an internal control. On the other hand, protocol parameters related to the PCR reaction and thermocycling conditions were optimized. The developed methodology led to the amplification of both viruses and the reference gene in pitahaya samples. This scientific tool enables phytosanitary monitoring of crops, stimulates the availability of virus-free plant material for new production projects and contributes to reducing operational costs and waste in molecular diagnostic laboratories.
Key words: viral infections, phytopathology, primers, diagnostic
Description:
CONDICIONAMIENTO DE PUBLICACION DE PROYECTO. La pitahaya (Hylocereus spp.) se ha consolidado como un fruto tropical de interés a nivel mundial en los últimos años. En Ecuador, es un producto de creciente importancia económica que ha posicionado al país como uno de los principales exportadores de Sudamérica. No obstante, su producción se ve limitada por infecciones virales que pueden comprometer el rendimiento y la calidad del fruto, particularmente aquellos causados por los géneros Potexvirus y Badnavirus. El presente proyecto tiene como objetivo establecer una metodología de RT-PCR múltiplex de punto final para la detección simultánea de los virus prevalentes en pitahaya. Para ello, se diseñaron y validaron cebadores que detectaron ambos grupos de virus, además de un gen constitutivo de la planta (ACT7) que actúa como control interno. Por otra parte, se optimizaron parámetros del protocolo relacionados con la reacción de PCR y las condiciones de termociclado. La metodología desarrollada permitió la amplificación de los virus y del gen de referencia en muestras de pitahaya. Esta herramienta posibilita el monitoreo fitosanitario de los cultivos, favorece la disponibilidad de material vegetal libre de virus para nuevos proyectos de producción y contribuye a la reducción de costos operativos y desechos en los laboratorios de diagnóstico molecular.
